Забанова Виктория Евгеньевна – ассистент кафедры офтальмологии; младший научный сотрудник лаборатории экспериментальной и клинической фармакологии
630091, г. Новосибирск, Красный просп., 52
Viktoriya E. Zabanova – Assistant, Department of Ophthalmology; Junior Researcher, Laboratory of Experimental and Clinical Pharmacology
52, Krasny prosp., Novosibirsk, 630091
Ершов Константин Игоревич – канд. биол. наук, доцент кафедры фармакологии, клинической фармакологии и доказательной медицины ; научный сотрудник лаборатории фармацевтических технологий
Новосибирск
Konstantin I. Ershov – Cand. Sci. (Bio.), Associate Professor, Department of Pharmacology, Clinical Pharmacology and Evidence-Based Medicine; Researcher, Laboratory of Pharmaceutical Technology
Novosibirsk
Селякова Мария Сергеевна – канд. мед. наук, старший преподаватель кафедры патологической анатомии
Новосибирск
Maria S. Selyakova – Cand. Sci. (Med.), Senior Lecturer, Department of Pathological Anatomy
Novosibirsk
Леонов Николай Петрович – канд. мед. наук, научный сотрудник лаборатории фармацевтических технологий
Новосибирск
Nikolai P. Leonov – Cand. Sci. (Med.), Researcher, Laboratory of Pharmaceutical Technology
Novosibirsk
Байкалов Герман Игоревич – клинический ординатор; младший научный сотрудник лаборатории фармакологического моделирования и скрининга биоактивных молекул
Новосибирск
German I. Baykalov – Resident, Department of Pharmacology, Clinical Pharmacology and Evidence-Based Medicine; Junior Researcher, Laboratory of Pharmacological Modeling and Screening of Bioactive Molecules
Novosibirsk
Фурсова Анжелла Жановна – д-р мед. наук, доцент, заведующий кафедрой офтальмологии; ведущий научный сотрудник
Новосибирск
Anzhella Zh. Fursova – Dr. Sci. (Med.), Associate Professor, Head, Department of Ophthalmology; Leading Researcher
Novosibirsk
Надеев Александр Петрович – д-р мед. наук, профессор, заведующий кафедрой патологической анатомии
Новосибирск
Aleksander P. Nadeev – Dr. Sci. (Med.), Professor, Head, Department of Pathological Anatomy
Novosibirsk
Мадонов Павел Геннадьевич – д-р мед. наук, доцент, заведующий кафедрой фармакологии, клинической фармакологии и доказательной медицины; руководитель отдела экспериментальной фармакологии
Новосибирск
Pavel G. Madonov – Dr. Sci. (Med.), Associate Professor, Head, Department of Pharmacology, Clinical Pharmacology and Evidence-Based Medicine; Head, Department of Experimental Pharmacology, Institute of Clinical and Experimental Lymphology
Novosibirsk
Введение. В условиях химического повреждения роговицы существенно нарушается ее клеточная структура, нуждающаяся в экстренной высокодифференцированной регенерации без выраженного пролиферативного компонента воспаления и экспансии иммунокомпетентных клеток для создания антимикробного потенциала. С целью фармакологической инициации этих процессов патогенетически обосновано исследование локального применения ферментных препаратов противовоспалительного действия, таких как субтилизин и гиалуронидаза.
Цель. Изучить влияние гиалуронидазы и субтилизина, пегилированных по технологии электронно-лучевого синтеза на полиэтиленгликоле (ПЭГ), на количество иммунокомпетентных клеток в области химической раны роговицы при их субконъюнктивальном и местном введении.
Материалы и методы. На 28 кроликах выполнено экспериментальное исследование влияния ферментов гиалуронидазы и субтилизина, пегилированных по технологии радиационного синтеза, на клеточный состав химической раны роговицы. Травму роговицы моделировали, используя методику щелочного ожога Обенберга. В правый глаз животного местно или субконъюнктивально вводился ПЭГ-субтилизин или ПЭГ-гиалуронидаза в зависимости от группы распределения, левый глаз животного использовался как контроль – в него вводили 0.9% NaCl. После проведения эксперимента выполнена энуклеация глаз животных. Полученный биоматериал использовали для приготовления гистологических препаратов с последующим их морфологическим изучением.
Результаты. Общее количество клеток в группах местного и субконъюнктивального применения ПЭГ-субтилизина составило 43 (40; 52) и 73 (33; 92), а субконъюнктивального применения ПЭГ-гиалуронидазы – 46 (37; 61), что оказалось выше количества клеток при применении 0.9% NaCl в этих группах (p < 0.01) и выше (p < 0.0001) количества клеток в группе местного применения ПЭГ-гиалуронидазы. Общее количество клеток при местном введении ПЭГ-гиалуронидазы составило 15 (13; 16), при местном применении 0.9% NaCl в данной группе – также 15 (14; 18) (p = 0.38). Количество нейтрофилов при применении ПЭГ-субтилизина составило 1 (1; 2) при местном и 0 (0; 1) при субконъюнктивальном применении, а при применении ПЭГ-гиалуронидазы – 0 (0; 0) как при местном, так и субконъюнктивальном пути введения.
Заключение. Введение ПЭГ-гиалуронидазы субконъюнктивально и ПЭГ-субтилизина как местно, так и субконъюнктивально приводит к усиленной миграции иммунокомпетентных клеток в зону химического повреждения роговицы, при этом миграция нейтрофилов незначительна. Она полностью отсутствует при применении ПЭГ-гиалуронидазы субконъюнктивально. Местное применение ПЭГ-гиалуронидазы не вызывает выраженного клеточного ответа иммунокомпетентных клеток в области химической раны роговицы, и эффект применения сравним с применением 0.9% NaCl.
Introduction. Under conditions of chemical damage to the cornea, its cellular structure is significantly disrupted, requiring emergency highly differentiated regeneration without an expressed proliferative component of inflammation and expansion of immunocompetent cells to gain an antimicrobial potential. For the purpose of pharmacological initiation of these processes, the study of the topical administration of anti-inflammatory enzyme preparations, such as subtilisin and hyaluronidase, is pathogenetically justified.
Aim. To study the effect of hyaluronidase and subtilisin, PEGylated (polyethylene glycol – PEG) using the technology of electron beam synthesis on the number of immunocompetent cells in the area of the corneal chemical injury during their subconjunctival and topical administration.
Materials and methods. An experimental study of the effect of PEGylated hyaluronidase and subtilisin enzymes, on the cellular composition of the corneal chemical injury was performed on 28 rabbits. Corneal injury was modeled using the Obenberger alkali burn technique. PEG-subtilisin or PEG-hyaluronidase was applied topically or subconjunctivally into the right eye of the animal, depending on the group, the left eye of the animal was used as a control – it was treated with 0.9% NaCl. After the experiment, enucleation was performed. The biomaterial obtained was used to prepare tissue specimens for morphological examination.
Results. The total count of cells in the groups of topical and subconjunctival administration of PEG-subtilisin was 43 (40; 52) and 73 (33; 92), and subconjunctival injection of PEG-hyaluronidase – 46 (37; 61), which was higher than the count of cells when using 0.9% NaCl in these groups (p < 0.01) and higher (p < 0.0001) cell numbers in the group of topical administration of PEG-hyaluronidase. The total count of cells with topical application of PEG-hyaluronidase was 15 (13; 16), with topical application of 0.9% NaCl of this group – also 15 (14; 18) (p = 0.38). The neutrophil count with the use of PEG-subtilisin was 1 (1; 2) with topical and 0 (0; 1) with subconjunctival administration, and with the use of PEG-hyaluronidase – 0 (0; 0) both with topical and subconjunctival administration.
Conclusion. The administration of PEG-hyaluronidase subconjunctivally and PEG-subtilisin both topically and subconjunctivally leads to an increased migration of immunocompetent cells to the area of the corneal chemical injury, while the migration of neutrophils is insignificant. It is completely absent when PEG-hyaluronidase is injected subconjunctivally. Topical administration of PEG-hyaluronidase does not induce a pronounced cellular response of immunocompetent cells in the area of the corneal chemical injury, and the effect of the application is comparable to that of 0.9% NaCl.
The authors declare that there are no conflicts of interest present.