Экспериментальное изучение хронической токсичности пегилированного интерферона лямбда-1

В в е д е н и е . Интерфероны лямбда (ИФН-λ), известные как интерфероны III типа (ИФН III типа), демонстрируют значительные перспективы в области антивирусной защиты. ИФН-λ схожи в своей антивирусной активности с ИФН I типа, но имеют уникальные механизмы индукции и функционирования благодаря специфичному расположению своих рецепторов. Рецепторы I типа экспрессируются в большинстве клеток с ядром, рецепторы ИФН-λ (IFN-λR1 или IL-28Rα) в основном обнаруживаются в эпителиальных клетках. ИФН-λ позиционируются как первая линия защиты при микробных атаках, поэтому создание лекарственных препаратов (ЛП) на их основе представляется весьма перспективным. Уже создан прототип энтерального ЛП на основе ИФН-λ, пегилированного по технологии электронно-лучевого синтеза.

Ц е л ь . В экспериментах in vivo изучить общие токсические свойства ЛП ИФН-λ1 при внутрижелудочном пути введения.

 М а т е р и а л ы и м е т о д ы . ЛП ИФН-λ1 ввoдили ежедневно внутрижeлудoчнo в дoзaх 2.6, 13.0 и 26.0 мкг/кг (1 терапевтическая доза (ТД), 5 ТД и 10 ТД соответственно) крысам и 2.6 и 13.0 мкг/кг (1 ТД и 5 ТД) кроликам один раз в день в течение 180 дней. Дoзы ЛП рaccчитывaлиcь для кaждoгo живoтнoгo индивидуaльнo, иcхoдя из мaccы тeлa. Нaблюдeниe зa кроликами ocущecтвлялocь в тeчeниe ввeдeния ЛП (180 дней), а для крыс – дополнительно в тeчeниe 30 днeй пocлe oкoнчaния ввeдeния (210 дней). У животных оценивали показатели витальных функций, поведенческие реакции, лабораторные параметры клеточного и биохимического состава крови, результаты электрокардиографии, показатели гемопоэза, патоморфологические признаки.

Р е з у л ь т а т ы . В ходе исследования не наблюдалось летальных исходов. Животные демонстрировали стабильное состояние здоровья, без видимых изменений в аппетите, внешнем виде и поведении. В ходе патоморфологического анализа не обнаружено аномалий, которые могли бы указывать на негативное воздействие вещества. Выявлено достоверное снижение массы и коэффициента массы тимуса и селезенки у крыс, получавших препарат в дозе 26.0 мкг/кг через 180 дней введения по сравнению с соответствующим контролем. Через 30 дней после отмены препарата масса и коэффициент массы тимуса и селезенки нормализовались во всех группах, где наблюдались отклонения. Микроскопическое исследование внутренних органов крыс, получавших максимальную дозу ЛП ИФН-λ1 (26.0 мкг/кг) на протяжении 180 дней, выявило специфические изменения в тимусе и селезенке, при этом анализ тимуса и селезенки у крыс, получавших более низкую дозу ЛП ИФН-λ1 (13.0 мкг/кг), не выявил аналогичных патологических изменений. Это указывает на возможность зависимости токсического воздействия от дозы препарата. Через 30 дней после отмены ЛП ИФН-λ1 масса и коэффициент массы тимуса и селезенки крыс, получавших максимальную дозу ЛП ИФН-λ1, возвращались к нормальным значениям и не отличались от соответствующего контроля. Как и у крыс, так и у кроликов показатели прироста массы тела, периферической крови и состояния костного мозга, биохимические показатели сыворотки крови как у самцов, так и у самок в экспериментальных и контрольных группах на протяжении всего исследования существенно не отличались. Патоморфологическое исследование не обнаружило изменений в таких критически важных органах, как мозг, сердце, легкие, печень и другие, что свидетельствует об отсутствии негативного воздействия лекарства на здоровье и состояние тканей кроликов.

З а к л ю ч е н и е . На основании экспериментов in vivo по изучению общетоксических свойств ЛП ИФН-λ1 при внутрижелудочном пути введения можно утверждать, что препарат относится к 4-му классу опасности (ГОСТ 12.1.007-76).

1. Kotenko S.V., Durbin J.E. Contribution of type III interferons to antiviral immunity: location, location, location // J. Biol. Chem. 2017;292(18):7295-7303. DOI: 10.1074/jbc.R117.777102.

2. O’Brien T.R., Young H.A., Donnelly R.P., ProkuninaOlsson L. Meeting overview: Interferon lambda – disease impact and therapeutic potential // J. Interferon Cytokine Res. 2019;39(10):586-591. DOI: 10.1089/jir.2019.0018.

3. Broggi A., Ghosh S., Sposito B. et al. Type III interferons disrupt the lung epithelial barrier upon viral recognition // Science. 2020;369(6504):706-712. DOI: 10.1126/science.abc3545.

4. Goel R.R., Wang X., O’Neil L.J. et al. Interferon lambda promotes immune dysregulation and tissue infl ammation in TLR7-induced lupus // Proc. Natl. Acad. Sci. USA. 2020;117(10):5409-5419. DOI: 10.1073/pnas.1916897117.

5. Shahbazi M., Amri Maleh P., Bagherzadeh M. et al. Linkage of lambda interferons in protection against severe COVID-19 // J. Interferon Cytokine Res. 2021;41(4):149-152. DOI: 10.1089/jir.2020.0187.

6. Мадонов П.Г., Ершов К.И., Дубровин А.В. и др. Электронно-лучевая модификация препаратов белковой природы для улучшения их фармакологических свойств // Медицина и образование в Сибири. 2013;4:83.

7. Yadav D., Dewangan H.K. PEGYLATION: an important approach for novel drug delivery system // J. Biomater. Sci. Polym. Ed. 2021;32(2):266-280. DOI: 10.1080/09205063.2020.1825304.

8. Киншт Д.Н., Мадонов П.Г., Кочнева Г.В. и др. Изучение противовирусной активности перорального лекарственного средства на основе иммобилизированного интерферона λ-1 / // Сибирский научный медицинский журнал. 2018;38(3):30-34. DOI: 10.15372/SSMJ20180304

9. Кихтенко Н.А., Ильичёва Т.Н., Дурыманов А.Г. и др. Изучение противовирусной активности рекомбинантного человеческого интерферона лямбда 1 на культуре клеток конъюнктивы человека // Сибирский научный медицинский журнал. 2021;41(5):3136. DOI: 10.18699/SSMJ20210504.

10. Мадонов П.Г., Святченко В.А., Легостаев С.С. и др. Изучение противовирусной активности рекомбинантного человеческого интерферона лямбда-1 в отношении SARS-СoV-2 // Бюллетень экспериментальной биологии и медицины. 2021;172( 7):65-69. DOI: 10.47056/0365-9615-2021-172-7-65-69.

11. Шерстобоев Е.Ю., Олейник Л.А., Жданов В.В. и др. Фармакокинетические параметры при пероральном введении пегилированного ИФН-λ1 / // Бюллетень экспериментальной биологии и медицины. 2022;173(2):188-192. DOI: 10.47056/0365-96152022-173-2-188-192.

12. Миронов А.Н. Руководство по проведению доклинических исследований лекарственных средств. М.: Гриф и К, 2012. Ч. 1.