Установление прижизненности повреждений кожных покровов иммуногистохимическим методом с использованием маркера TNF-α

В в е д е н и е . Установление прижизненности повреждений представляет собой одну из наиболее сложных и актуальных задач судебной медицины, имеющую неоспоримую значимость. Традиционные гистологические методы, основанные на оценке элементов воспалительной реакции, часто недостаточно чувствительны для диагностики повреждений, возникших незадолго до наступления смерти. Разработка и внедрение высокочувствительных молекулярно-морфологических методов является важным направлением развития экспертной практики. 
Ц е л ь . Оценка диагностической ценности такого иммуногистохимического маркера, как фактор некроза опухоли альфа (TNF-α), и метода количественного цифрового анализа для объективного установления прижизненного происхождения повреждений кожи, причиненных тупыми предметами. 
М а т е р и а л ы и м е т о д ы . Проведено исследование образцов кожи от 14 трупов с документально подтвержденными прижизненными повреждениями (всего 28 срезов, 140 полей зрения). Изъятие образцов осуществлялось из области наружного повреждения, также изымался контрольный образец тканей из неповрежденной области. Парафиновые срезы окрашивались моноклональными антителами к TNF-α. Цифровые изображения анализировались с помощью программного обеспечения Fiji с применением цветовой деконволюции для выделения DAB-окраски и последующего определения площади экспрессии маркера в эпидермисе и дерме отдельно. 
Р е з у л ь т а т ы . Обнаружено статистически значимое увеличение площади экспрессии TNF-α в зоне повреждения по сравнению с интактной кожей контрольных образцов. В эпидермисе разница по медианам составила –16,66 % (p = 0,0002), в дерме –7,93 % (p = 0,0072). 
З а к л ю ч е н и е . Иммуногистохимическое выявление TNF-α в сочетании с количественным анализом цифровых изображений является высокоинформативным и объективным методом для установления прижизненности повреждений кожных покровов, который позволяет выявлять ранние молекулярные признаки альтерации, предшествующие морфологическим изменениям, и минимизирует субъективный фактор при интерпретации результатов, что повышает доказательственную ценность судебно-медицинского заключения.

1. Куприянов Д.Д., Федулова М.В. Выявление некоторых маркеров ранней фазы воспалительно-репаративного процесса при механических повреждениях кожи // Судебно-медицинская экспертиза. 2024;67(2):17-19. DOI: 10.17116/sudmed20246702117.

2. Судебная медицина : национальное руководство / Ю.И. Пиголкин, Д.Д. Куприянов, А.В. Копылов и др.; под ред. Ю.И. Пиголкина. М.: ГЭОТАРМедиа, 2018. 576 с.

3. Суркова Е.И. Определение давности механических повреждений иммуногистохимическим методом // Проблемы экспертизы в медицине. 2014;14(4(56)):12-14.

4. Федулова М.В., Куприянов Д.Д. Достоверность иммуногистохимической оценки прижизненности и давности повреждений: анализ и перспективы исследований // Судебно-медицинская экспертиза. 2020;63(2):52-57. DOI: 10.17116/sudmed20206302152.

5. Ohshima T. Forensic wound examination // Forensic Sci. Int. 2000;113(1-3):153-164. DOI: 10.1016/s0379-0738(00)00269-3.

6. Cecchi R. Estimating wound age: looking into the future // Int. J. Legal Med. 2010;124(6):523-536. DOI: 10.1007/s00414-010-0505-x.

7. Grellner W., Madea B. Demands on scientific studies: vitality of wounds and wound age estimation // Forensic Sci. Int. 2007;165(2-3):150-154. DOI: 10.1016/j.forsciint.2006.05.029.

8. Wenzlow N., Mills D., Byrd J. et al. Review of the current and potential use of biological and molecular methods for the estimation of the postmortem interval in animals and humans // J. Vet. Diagn. Invest. 2023;35(2):97- 108. DOI: 10.1177/10406387231153930.

9. Crowe A.R., Yue W. Semi-quantitative determination of protein expression using immunohistochemistry staining and analysis: an integrated protocol // Bio Protocol. 2019;9(24):e3465. DOI: 10.21769/BioProtoc.3465.

10. Idriss H.T., Naismith J.H. TNF alpha and the TNF re ceptor superfamily: structure-function relationship(s) // Microsc. Res. Tech. 2000;50(3):184-195. DOI: 10.1002/1097-0029(20000801)50:3<184::AIDJEMT2>3.0.CO;2-H.

11. Panwar R., Shekhawat R.S., Shukla K.K. et al. Quantitative estimation of TNF-α and IL-3 by using ELISA from human lung tissue in fatal asphyxial deaths // J. Forensic Leg. Med. 2023;98:102559. DOI: 10.1016/j.jflm.2023.102559.

12. Spiekstra S.W., Toebak M.J., Sampat-Sardjoepersad S. et al. Induction of cytokine (interleukin-1alpha and tumor necrosis factor-alpha) and chemokine (CCL20, CCL27, and CXCL8) alarm signals after allergen and irritant exposure // Exp. Dermatol. 2005;14(2):109- 116. DOI: 10.1111/j.0906-6705.2005.00226.x.

13. Зиновкин Д.А. Роль воспалительного компонента опухолевого микроокружения эндометриоидной аденокарциномы тела матки при различных исходах заболевания // Опухоли женской репродуктивной системы. 2016;12(1):73-78. DOI: 10.17650/1994-4098-2016-12-1-73-78.

14. Fiji. URL: https://imagej.net/software/fiji/#publication (дата обращения: 14.12.2025).