Структурные изменения в печени мышей при БЦЖ-гранулематозе и применении окисленного декстрана в возрастной динамике

В в е д е н и е . Туберкулезный гранулематоз у новорожденных и детей встречается значительно реже, чем у взрослых, и в особенности его висцеральные формы, в том числе поражение печени. Окисленный декстран усиливает продукцию кислородных радикалов, цитотоксический и бактерицидный потенциал фагоцитов, ускоряет процесс фаголизосомного слияния и элиминации возбудителя, снижая гранулематозный воспалительный процесс в органах.

Ц е л ь  и с с л е д о в а н и я . Изучить морфологические изменения в печени мышей от периода новорожденности до взрослого возраста при введении вакцины БЦЖ и применении окисленного декстрана.

М а т е р и а л ы  и  м е т о д ы . Мышей линии С₅₇В₁/6 (всего 200 особей) разделили на 4 группы: мышам из 1-й (интактной) группы вводили 0.02 мл/кг 0.9% раствора натрия хлорида в первые сутки после рождения. Мышам из 2-й группы на 2-е сутки после рождения вводили раствор окисленного декстрана молекулярной массой 40 кДа. Мышам из 3-й группы в первые сутки с момента рождения вводили раствор вакцины БЦЖ 0.02 мг/кг. Мышам 4-й группы вводили раствор вакцины БЦЖ 0.02 мг/кг, на вторые сутки с момента рождения – раствор окисленного декстрана молекулярной массой 40 кДа.

Р е з у л ь т а т ы . Численная плотность (N_ai) гранулем в печени прогрессивно увеличивалось с 28-х к 56-м суткам эксперимента у мышей 3-й и 4-й групп в 13.5 раза. Однако у мышей 4-й группы количество гранулем было меньшим в 1.4 раза в сравнении с аналогичным показателем у мышей 3-й группы. Диаметр гранулем в печени у мышей 4-й группы был меньшим на 28-е и 56-е сутки в сравнении с аналогичным показателем у мышей 3-й группы в 2 раза и 1.3 раза соответственно. У мышей 4-й группы объемная плотность (Vv) дистрофически измененных гепатоцитов с 3-х по 5-е сутки была меньшей в 8 раз в сравнении с аналогичным показателем у мышей 3-й группы, на 10-е и 28-е сутки – в 1.7  и 1.2 раза соответственно. Vv очагов некроза гепатоцитов у мышей 4-й группы не отличалась от аналогичного показателя у мышей 1-й (интактной) и 2-й (контрольной) групп во все периоды наблюдения и была меньшей на 3-и и 56-е сутки в сравнении с аналогичным показателем у мышей 3-й (БЦЖ) группы в 3 раза. На 28-е и 56-е сутки эксперимента у мышей из 3-й и 4-й групп отмечается увеличение N_ai двуядерных гепатоцитов и гепатоцитов с митозами в сравнении с аналогичным показателем у мышей 1-й и 2-й групп. У мышей 4-й группы количество двуядерных гепатоцитов, отражающее репаративную регенерацию гепатоцитов, было большим на 28-е и 56-е сутки в сравнении с аналогичным показателем у мышей 3-й группы в 1.8 раза.

З а к л ю ч е н и е . Гранулемообразование (количество и диаметр гранулем) в печени мышей при введении вакцины БЦЖ и применении окисленного декстрана было выражено в меньшей степени в сравнении с не леченными окисленным декстраном животными, что свидетельствует об эффективной элиминации возбудителя в фагоцитах. Деструктивные изменения (дистрофические изменения и некроз гепатоцитов) в паренхиме печени мышей при введении вакцины БЦЖ и применении окисленного декстрана значительно снижаются, при этом активизируются процессы репаративной регенерации в паренхиме печени мышей, что обусловлено гепатотропным эффектом окисленного декстрана.

1. Global Tuberculosis Report 2021. Geneva: World Health Organization, 2021. 57 p.

2. О состоянии санитарно-эпидемиологического благополучия населения в Российской Федерации в 2019 году: Государственный доклад. М.: Федеральная служба по надзору в сфере защиты прав потребителей и благополучия человека, 2020. 299 с.

3. Шкурупий В.А. Туберкулезный гранулематоз. Цитофизиология и адресная терапия. М.: Изд-во РАМН, 2007. 536 с.

4. Ткачев В.О., Зайковская М.В., Троицкий А.В., Лузгина Н.В., Шкурупий В.А. Влияние окисленных декстранов на продукцию активных форм кислорода фагоцитами перитонеального экссудата мышей // Биомедицинская химия. 2013;59(1):81–89.

5. Старостенко А.А., Троицкий А.В., Медведев В.С. и др. Исследование фармакокинетики окисленных декстранов // Химико-фармацевт. журнал. 2015;49(12):3–6. DOI: 10.30906/0023-1134-2015-4912-3-6.

6. Надеев А.П., Шкурупий В.А., Маринкин И.О. Печень и плацента в пери- и постнатальный периоды при патологии: Клинико-экспериментальное исследование. Новосибирск: Наука, 2014. 244 с.

7. Helmo F.R., Alves E.A.R., Moreira R.A.A. et al. Intrauterine infection, immune system and premature birth // J. Matern.-Fetal Neonatal Med. 2018;31(9):1227–1233. DOI: 10.1080/14767058.2017.1311318.

8. Upadhyay S., Mittal E., Philips J.A. Tuberculosis and the art of macrophage manipulation // Pathog. Dis. 2018;76(4):fty037. DOI: 10.1093/femspd/fty037.

9. Khan N., Vidyarthi A., Pahari S., Agrewala J.N. Distinct strategies employed by dendritic cells and macrophages in restricting Mycobacterium tuberculosis infection: Diff erent philosophies but same desire // Int. Rev. Immunol. 2016;35(5):386–398. DOI: 10.3109/08830185.2015.1015718.

10. Mosser D.M., Edwards J.P. Exploring the full spectrum of macrophage activation // Nat. Rev. Immunol. 2008;8(12):958–969. DOI: 10.1038/nri2448.

11. Ильин Д.А., Шкурупий В.А. Особенности М1/М2-поляризации макрофагов БЦЖинфицированных мышей in vitro // Бюл. эксперимент. биологии и медицины. 2020;169(4):449–451.

12. Нещадим Д.В., Архипов С.А., Шкурупий В.А., Ахраменко Е.С., Троицкий А.В. Исследование влияния липосомальной формы декстразида на экспрессию катепсинов B и D макрофагами in vitro // Cиб. науч. мед. журн. 2017;37(6):16–21.

13. Nakagaki B.N., Mafra K., de Carvalho E. et al. Immune and metabolic shifts during neonatal development reprogram liver identity and function // J. Hepatol. 2018;69(6):1294–1307. DOI: 10.1016/j.jhep.2018.08.018.

14. Alexander B., Guzail M.A., Foster C.S. Morphological changes during hepatocellular maturi ty in neonatal rats // Anat. Rec. 1997;248(1):104–109. DOI: 10.1002/(SICI)1097-0185(199705)248:1<104::AIDAR12>3.0.CO;2-T.

15. Mohareer K., Asalla S., Banerjee S. Cell death at the cross roads of host-pathogen interaction in Mycobacterium tuberculosis infection // Tuberculosis (Edinb.). 2018;113:99–121. DOI: 10.1016/j.tube.2018.09.007.

16. Шкурупий В.А., Карпов М.А., Клочин В.Д. Влияние окисленного декстрана на гепатоциты крыс при токсическом гепатозе смешанной этиологии // Сиб. науч. мед. журн. 2021; 41(5):25–30. DOI: 10.18699/SSMJ20210503.

17. Fausto N., Campbell J.S., Riehle K.J. Liver regeneration // J. Hepatol. 2000;32(1):19–31.

18. Fujiyoshi M., Ozaki M. Molecular mechanisms of liver regeneration and protection for treatment of liver dysfunction and diseases // J. Hepatobiliary Pancreat. Sci. 2011;18(1):13–22. DOI: 10.1007/s00534-010-0304-2.

19. Wang C.P., Zhou L., Su S.H. et al. Augmenter of liver regeneration promotes hepatocyte proliferation induced by Kupffer cells // World J. Gastroenterol. 2006;12(30):4859–4865. DOI: 10.3748/wjg.v12.i30.4859.

20. Анацкая О.В., Виноградов А.Е. Полногеномные дупликации в эволюции, онтогенезе и патологии: резерв сложности и запаса прочности // Молекулярная биология. 2021;55(6)927–943. DOI: 10.31857/S0026898421060021.